pcr技术中dna聚合酶的作用（PCR的黄金搭档Taq）

　　PCR(聚合酶链式反应)是由美国PE-Cetus公司发明的一种体外促进特异性DNA片段合成的生物检测技术，广泛应用于生物科学研究领域中。

　　PCR技术主要有①高温变性：在94℃的温度下促使提取的原始DNA双链(模板)及扩增得来的双链DNA解离，成为单链，为后续扩增做准备;②低温退火复性：在55℃的条件下，解开的DNA单链与上下游引物结合;③适温延伸：DNA模板-引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下，以dNTP为原料，顺着引物继续延伸生成一条与模板DNA配对的复制链这三个基本步骤。这三个步骤周而复始、不断循环，上一循环生成的新DNA链又成为下一次循环的模板，短时间内就能将目的基因扩增几十万甚至几百万倍!

　　如此精妙的生物科技手段一度让科学家们犯了难，PCR技术对温度的严格要求对各反应原料都提出了挑战，尤其是DNA聚合酶，因为大多数酶都在高温时变性失活。DNA聚合酶相当于“针线”，将一个个单独的核苷酸“缝”在DNA模板链上。最开始时PCR反应使用的酶是从大肠杆菌中分分离的Klenow酶，虽然耐热，但是不耐高温，每个循环都要重新添加一次酶，严重阻碍了PCR技术的普及推广，直至在一种水生栖热菌中提取出Taq DNA聚合酶,这种酶在90℃以上仍能保持活性，变性温度在95℃20秒的情况下，50个循环后保有50%的酶活性，所以称它为PCR反应的“黄金搭档”也不为过。

　　目前行业中研制生产的2×Taq PCR Master Mix(Taq酶预混液)，科学配比添加了DNA Ploymerase、PCR Buffer及dNTP Mix等多种PCR原料，有含染料与不含染料(电泳时所必需的色素试剂)两种供您选择，您只需要添加模板、上游引物、下游引物和dd水便可进行PCR反应，灵敏度高，特异性强，线性范围广，简单方便。