脂肪细胞的原代培养（脂肪干细胞培养和扩增实验）

简介分离获得ASC后，可以通过连续传代使其生长和扩增原代培养后，传代2〜3次，ASCs呈现单层，大而扁的细胞形态，其直径在25〜30μm待细胞达到汇合时，它们形态上呈纺锤体形，类似于成纤维细胞来源：《人干细胞培养》，下面我们就来聊聊关于脂肪细胞的原代培养?接下来我们就一起去了解一下吧!

脂肪细胞的原代培养

简介

分离获得ASC后，可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后，传代2〜3次，ASCs呈现单层，大而扁的细胞形态，其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时，它们形态上呈纺锤体形，类似于成纤维细胞。来源：《人干细胞培养》

操作方法

材料与仪器

脂肪干细胞 ASC培养基 组织培养瓶25cm2

步骤

(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。

(b)换液时通过弃去培养基，从而去除未贴壁的细胞。

(c)以后每周更换培养基2次。

材料与仪器

脂肪干细胞 ASC培养基PBSA胰蛋白酶 组织培养瓶25cm2(T-25)细胞刮

步骤

(a)细胞达到80%汇合时即可传代。

(b)弃去培养基，加人PBSA洗涤贴壁细胞。

(c)加入足量胰蛋白酶，使之覆盖细胞，将培养瓶中，置于37℃，5%CO2温箱中。

(d)细胞与胰蛋白酶共孵育3 min后，用细胞刮将细胞刮下。

(e)加人ASC培养基使胰蛋白酶失活。

(f）按照1:2比例，将细胞接种至2个T-25培养瓶中。