菌株怎么活化(如何爬大板纯化产物)

样品要求:因为硅胶板是弱酸性的,对酸不稳定的化合物尽量避免爬大板;对空气,水,有机溶剂稳定; 低沸点的溶剂里要好溶;最好有紫外吸收;极性不能太大(至少展开剂能爬起来),今天小编就来聊一聊关于菌株怎么活化?接下来我们就一起去研究一下吧!

菌株怎么活化(如何爬大板纯化产物)

菌株怎么活化

样品要求:因为硅胶板是弱酸性的,对酸不稳定的化合物尽量避免爬大板;对空气,水,有机溶剂稳定; 低沸点的溶剂里要好溶;最好有紫外吸收;极性不能太大(至少展开剂能爬起来)。

上样:尽量少的溶剂溶解样品,最好是易挥发的,二氯甲烷最常用,如果不溶可以加几滴甲醇促溶。可以用一次性滴管塞棉花后剪成毛笔状上样,每个人的办法都不同,小编就是这么弄的,顺便练练毛笔字。上样时也最好像写毛笔字一样一气呵成,这样跑出来的带比较均匀。如样品溶液太多需要上两遍样,先用吹风机吹干溶剂后再上样。

跑板:展开剂的选择,先用小板爬样,具体怎么爬小板,请回看往期文章(TLC薄层层析技术),选到合适的展开剂后,配好溶剂爬大板,由于大板和小板由细微的差别,大板展开剂的极性可以稍微比小板展开剂的极性大一点,一样的话也问题不大。跑板最好要跑到快顶端1cm左右,充分展开样品,切记不要跑过,跑过的话,极性小的点可能会被展开剂冲都一起,而极性大的点虽然不会冲到上面,但会变散,不容易判断色带的边缘。

检测:产品的判断,通过极性大致判断哪几个色带可能是产品,然后每个色带可以先刮一点,碾碎,加甲醇溶解,过滤送LCMS检测判断。

刮板:判断好色带后,在紫外灯下,用铅笔描好荧光带,开始刮板。带好口罩很重要,小编是用美工刀刮的,刮不干净的可以用小板刮可以刮干净。

洗脱:挂好的硅胶,量少的话,可以隔着称量纸用试管擀碎。量多的话,直接装到自封袋里面随便蹂躏,直到成粉末为止。粉末状的硅胶样品的洗脱,大部分人是直接加溶剂泡出来。但小编用的是,把硅胶粉直接装到柱子(有底层砂芯的那种)里,上层铺一薄薄的石英砂,直接像过柱子一样在上层加溶剂压出来,这种方法的好处就是,对于溶解性不好的样品可以快速洗出,用相对较少的溶剂洗出产品。加入溶剂洗脱的时候可以随时点板看产品是否已经完全洗出。

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