分类鉴别细菌常用方法（如何有效地鉴别与分析活细菌与死细菌）

说起细菌染色，可能浮现在大家脑海里的第一印象就是：革兰氏染色(Gram stain)。作为细菌学最广泛使用的鉴别染色方法，革兰氏染色的主要步骤是：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而后经碘液进行媒染，之后用酒精脱色，在一定条件下有的细菌媒染后的颜色不会脱去，有的可以被脱去，前者叫做革兰氏阳性菌，后者为革兰氏阴性菌。为方便进一步观察，脱色后再用碱性蕃红进行复染，阳性菌仍为紫色，阴性菌染成红色，这就是革兰氏染色的原理。

那么有没有一种方法可以有效地鉴别与分析活细菌与死细菌呢？活细菌染色试剂盒：

MycoLight™ Flow Cytometric Live Bacteria Assay Kit 流动流式细胞术活细菌检测试剂盒

流式细胞仪

MycoLight™ Live Bacteria Fluorescence Imaging Ki 活细菌荧光成像试剂盒

荧光显微镜

原理：MycoLight™520是一种非荧光酯酶底物，可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。在细菌细胞内非特异性酯酶水解后，产生绿色荧光产物并在细菌内积累。与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比，该活细菌染色试剂盒可提供更明亮，更稳定的信号，背景更低，染色方案更容易。

结果展示：

《免疫荧光显微镜-Cat#22409》

* 用CFDA或MycoLight™活细菌荧光成像试剂盒染色的大肠杆菌的荧光图像。CFDA在成像之前需要洗涤步骤以最小化背景，而使用该试剂盒不需要洗涤（Cat＃22409）。MycoLight™520的染色效率远高于CFDA，因为更多的细菌显示出绿色荧光。在染色1小时后，MycoLight™520的信号仍留在细胞中，而CFDA很容易漏出。在每个样品中呈现相同量的细菌，并且在相同的暴露时间下拍摄荧光图像。

《流式细胞仪-Cat#22407》

* 使用ACEA NovoCyte流式细胞仪在FITC通道中分析大肠杆菌悬浮液的相对活力。读数（计数（％））获自各种活/死大肠杆菌混合物。通过两个不同的峰可以容易地区分每种混合物中的活的和死的种群。

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