细胞毒性实验定性定量评价（细胞增殖与毒性检测实验）

细胞增殖是活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征 ，是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。细胞增殖是指细胞在周期调控的因子下，通过DNA复制等反应，完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中的细胞数量的变化，进而反应细胞的生长状态及活性，细胞增殖检测主要分为四类：DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。

细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标，如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测指标通常包括细胞膜对核酸染料的通透性、代谢活性、膜电位等。

细胞活性的检测相当于细胞增殖能力的测定，采用特殊的试剂测定细胞的代谢活力或细胞代谢产物，通过检测细胞的氧化还原活性反映细胞增殖能力，属于间接检测细胞增殖能力的方法。

下面简单介绍一下MTT、MTS、CCK-8检测的区别

MTT全称 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐, 活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。对于细胞样本加入MTT试剂反应，形成甲臜结晶。随后加入二甲基亚砜(DMSO)重新溶解细胞中的甲臜，得到紫色混合液。用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值。细胞存活率=(实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)*100%。

Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。